技術(shù)文章
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(一)原理由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制,因此可以形成“連續(xù)系統(tǒng)”和“不連續(xù)系統(tǒng)”兩種電泳系統(tǒng)?!安贿B續(xù)系統(tǒng)”大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是:(1)使用兩種不同濃度的凝膠系統(tǒng);(2)配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及pH不同,并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH也不相同。在實驗中,電泳凝膠分為兩層:上層膠為低濃度的大孔膠,稱為濃縮膠或成層膠,配制此層膠的緩沖液是Tris-HCl,pH6.7;下層膠則是高濃度的小孔膠,稱為分離膠或電泳膠,成膠的緩...
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【原理】瓊脂糖(agarose)是經(jīng)過挑選,以質(zhì)地較純的瓊脂(agar)作為原料而制成的。瓊脂在化學(xué)上是由瓊脂糖和瓊脂膠組成的復(fù)合物。瓊脂膠是一含有硫酸根和羥基的多糖,它具有離子交換性質(zhì),這種性質(zhì)會給電泳及凝膠過濾以的影響。瓊脂糖是直鏈多糖,它由D-半乳糖和3,6-脫水-L-半乳糖的殘基交替排列組成。瓊脂糖主要通過氫鍵而形成凝膠。電泳時因凝膠含水量大(98-99%),近似自由電泳,因為固體支持物的影響少,故電泳速度快,區(qū)帶整齊。而且由于瓊脂糖不含帶電荷的基團,電滲影響很少,是...
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凝膠過濾層析(gelfiltrationchromatography)法又稱排阻層析或分子篩方法,主要是根據(jù)蛋白質(zhì)的大小和形狀,即蛋白質(zhì)的質(zhì)量進行分離和純化。層析柱中的填料是某些惰性的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)物質(zhì),多是交聯(lián)的聚糖類物質(zhì),使蛋白質(zhì)混合物中的物質(zhì)按分子大小的不同進行分離。實驗方法蛋白質(zhì)的凝膠過濾分離實驗材料蛋白質(zhì)試劑、試劑盒凝膠過濾緩沖液儀器、耗材布氏漏斗凝膠過濾層析柱分光光度計實驗步驟1.如果凝膠過濾的介質(zhì)是干粉,則需在凝膠過濾緩沖液中*溶脹。2.在遠離過往通道及直接光照的...
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實驗原理瓊脂糖凝膠電泳常用于分離、鑒定DNA、RNA分子混合物,以瓊脂凝膠作為支持物,利用DNA分子在電場中時的電荷效應(yīng)和分子篩效應(yīng),達到分離混合物的目的。DNA分子在高于其等電點的溶液中帶負(fù)電,在電場中由陰極向陽極運動。在一定的電場強度下,忽略DNA分子攜帶的電荷,DNA分子的遷移速度取決于分子篩效應(yīng),即分子本身的大小和構(gòu)型是主要的影響因素。DNA分子的遷移速度與相對分子量成反比。不同構(gòu)型的DNA分子的遷移速度不同。如環(huán)形DNA分子樣品,其中有三種構(gòu)型的分子:超螺旋分子(c...
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蠕動泵的原理簡介:蠕動泵由于輸出的流量非常穩(wěn)定因此又叫恒流泵,由于蠕動泵是靠擠壓軟管而達到泵送流體的功能的因此又叫軟管泵。蠕動泵的機械原理十分簡單。它是由轉(zhuǎn)輪擠壓著泵管并轉(zhuǎn)動從而推動管內(nèi)的流體向前移動從而產(chǎn)生流體流動的,就象用兩根手指夾擠一跟充滿液體的軟管一樣,隨著手指的移動,管內(nèi)形成負(fù)壓,液體隨之流動。蠕動泵、恒流泵和軟管泵的特點:1、潔清無污染:流體只通過和接觸蠕動泵軟管。2、精度高:恒流、重現(xiàn)精度高達0.5%,流量可**調(diào)節(jié)。3、低剪切力:是輸送剪切敏感,侵蝕性強流體的...
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